期刊刊名：科學與工程技術期刊 　 卷期：16卷2期

篇名出版日期：2020年9月1日

作者：吳芳禎,李建德,施英隆

語言：Chinese

關鍵字：ε-聚離胺酸,聚離胺酸分解酵素,放線菌白色鏈球菌,酵素純化,離子交換層析,外切型酵素,ε-Poly lysine, ε-PL-degrading enzyme, Streptomyces albulus, enzyme purification, ion exchange chromatography, exo-type degradation

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摘要：
ε-聚離胺酸（ε-poly-lysine;ε-PL）是由微生物發酵生產的天然生物性材料，它的應用潛力廣，然而生合成作用機制還未明，調控機制則仍十分模糊。ε-PL分解酵素（PL degrading enzyme; PLD）與ε-PL之生產有密切關係，除可影響其分子量外亦為探討ε-PL之生合成機制之一重要工具。我們曾篩選出一株具有能忍受ε-PL之菌株且具ε-PL合成與ε-PL分解能力之菌株S. albulus PLT1，此菌株之ε-PL分解酵素為膜結合酵素。S. albulus PLT1之ε-PL分解酵素經分離純化，已知其分子量約為39.5 kDa。本研究接續先前之研究，進行ε-PL分解酵素之特性鑑定及探討其生化活性； ε-PL分解酵素的特性分析發現，其對ε-PL之作用型態為外切型酵素，以L-lysyl-p-nitroanilide （Lys−PNA）為基質時，最適反應溫度為30℃，最適pH 值為7.0，在20-40℃保存時酵素活性穩定，在50℃以上保存時酵素活性迅速下降。最大反應速率Vmax= 0.068 mmol/L/min ，米氏常數Km= 0.127 mmol/L。ε-PL分解酵素是一種金屬酶，EDTA處理後酵素活性完全消失，加入Ca²⁺、Fe³⁺、Mg²⁺及Zn²⁺可有效恢復酵素活性，分別為94%、92%、85%及70%。Co⁺² 可恢復酵素活性42%，Fe²⁺、Mn²⁺、Cu²⁺、Ni²⁺及Hg²⁺則無法恢復酵素活性。

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