期刊刊名：科學與工程技術期刊 　 卷期：18卷1期

篇名出版日期：2022年3月1日

作者：顧振旗,吳淑姿,余世宗,Zhen-Qi Gu, Shwu-Tzy Wu, Shih-Tsung Yu

語言：Chinese

關鍵字：N-乙醯幾丁寡醣,N-乙醯幾丁三醣,幾丁質分解酶,N-acetylchitooligosaccharides, N-acetylchitotriose, chitinase

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摘要：
探討不同培養條件（不同碳源、氮源、α-幾丁質濃度、β-幾丁質濃度和通氣量）對菌株Aeromonas hydrophila Too12生產N-乙醯幾丁寡醣的影響。菌株培養於2% α-幾丁質與膠態幾丁質72 h，水解產物以N-乙醯幾丁三醣為主，分別為0.48與0.47 g/L。菌株培養於5% α-幾丁質144 h，水解產物N-乙醯葡萄糖胺2.85 g/L與N-乙醯幾丁三醣2.42 g/L。培養於4% β-幾丁質，生成水解產物含有N-乙醯幾丁四醣0.68 g/L。以蛋白腖、酵母抽出物及胰化蛋白為氮源之培養，其幾丁質分解酶活性、還原醣生成量及幾丁質水解產物相近。於高溶氧的批次發酵培養96 h，N-乙醯幾丁三醣產量為0.64 g/L。於低溶氧的批次發酵培養72 h，N-乙醯葡萄糖胺與N-乙醯幾丁三醣，分別有1.26 與1.1 g/L。不通氣的批次發酵培養96 h，N-乙醯葡萄糖胺為2.55 g/L。培養菌株之粗酵素液，經硫酸銨沉澱、透析、離子交換層析（DEAE-Sepharose CL-6B）和膠體過濾層析（Sephacryl S-100）純化步驟，收集具活性之波峰，利用活性染色分析，33 kDa蛋白質於膠片上有明顯活性。酵素最適反應溫度與pH值分別為40℃與6.0。Hg2⁺、Zn2⁺及Mn2⁺金屬離子對幾丁質分解酶活性具抑制作用，EDTA對幾丁分解酶之活性具促進作用。

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