期刊刊名：健康與照顧科學學刊 　 卷期：1卷1期

篇名出版日期：2012年2月1日

作者：吳秋曄,梁志欽

語言：Chinese

關鍵字：脫氮菌,亞硝酸還原酵素,核酸探針,Denitrifier, Nitrite reductase, Nucleic acid probe

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摘要：
本研究之目的在篩選分別能與具有 cytochrome c,d1型或 Cu型亞硝酸還原酵素的脫氮菌雜交的核酸探針。該核酸探針是以基因序列（ 5'→ 3'）分別為 GTC AAG GTG GAA CTG GTC AA與 CCT GTT GGC TTG CGA ATG AA作為聚合酵素連鎖反應中的引子，14株具有 Cu 型亞硝酸還原酵素的脫氮菌之 DNA做為模板，進行聚合酵素連鎖反應後，純化聚合酵素連鎖反應產物做為核酸探針，分別與實驗菌株進行雜交試驗。雜交結果顯示，以 Alcaligenes eutrophus BCRC 13036之 DNA為模板， Mg²⁺濃度為 1.2 mM，鍊合溫度為 42.5℃，複製出約 781 bp的 Cu型亞硝酸還原酵素的基因片段，作為核酸探針，可與具有 cytochrome c,d1型或 Cu型亞硝酸還原酵素的多種不同屬之脫氮菌雜交。

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