期刊刊名：健康管理學刊 　 卷期：11卷2期

篇名出版日期：2013年12月1日

作者：周瑞玲,周澄興,鄒國鳳,楊均威

語言：Chinese

關鍵字：感溫性,紅色螢蛋白質DsRed,聚氮異丙基丙烯醯胺,較低臨界溶解溫度,丙烯酸,Temperature-sensitive, Red fluorescent protein DsRed,Poly N-isopropylacrylamide, LCST, Acrylic acid

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摘要：
聚氮異丙基丙烯醯胺(poly(N-isopropyl acrylamide), PNIPAAm)是已知具感溫性的高分子材料。當溫度高於其較低臨界溶解溫度(Lower Critical Solution Temperature, LCST)時，聚合物是厭水性而且不溶於水；反之，溫度低於其LCST 時，聚合物會在水中呈現水合膨潤狀態。本研究利用添加不同比例的第二單體丙烯酸(acrylic acid, AAc)與NIPAAm 形成共聚物，來調整水膠的LCST 更接近體溫。同時製造並純化紅色螢蛋白質DsRed 重組蛋白質當追蹤劑，來偵測水膠對DsRed 蛋白質的吸收與釋放行為。為確保DsRed 蛋白質之螢光活性，不使用化學性固定劑而選擇物理性的包覆法，利用水膠低於其LCST 時對蛋白質進行膨潤吸收，而將蛋白質分子包覆於水膠中，高於其LCST 時水膠收縮而將蛋白質分子排出。實驗結果顯示，在磷酸緩衝溶液(PBS, pH7.4)中，水膠的丙烯酸含量0%增至0.27%時，其LCST 由28℃提昇到40℃，同時對蛋白質吸附量也隨之升高，並且LCST 接近於體表溫度之丙烯酸含量為0.19%之水膠仍保有良好溫度感應性。以含0.11%與0.19%丙烯酸之水膠進行蛋白質吸收和釋放實驗，將膠體浸泡在25℃之紅色螢光蛋白質DsRed (0.075mg/ml)溶液24 小時後，轉置於35℃之緩衝液，在不同時間後照像分析膠體內殘留紅螢光蛋白質之影像強度。結果發現兩種膠體在30 分鐘時即可釋放約為80 至90%之蛋白質量，顯示這些水膠在不喪失對溫度的敏感性的情況下，仍具良好包載和釋放蛋白質的能力。

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