期刊刊名：健康管理學刊 　 卷期：13卷2期

篇名出版日期：2015年12月1日

作者：洪志宏,董陳峰,王海龍

語言：Chinese

關鍵字：台灣欒樹胰蛋白酶抑制劑,Kunitz-type 蛋白酶抑制劑,解離常數, Koelreuteria formosana trypsin inhibitor, Kunitz-type protein inhibitor, dissociation constant

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摘要：
由台灣欒樹(Koelreuteria formosana)種子純化出胰蛋白酶抑制劑(Koelreuteria formosanatrypsin inhibitor)，簡稱KFTI，純化過程是利用硫酸銨分割(70-90%)、Sephadex G-50膠體分離管柱、DEAE-cellulose陰離子交換樹酯及trypsin-Sepharose親和性色層分析法，以15% SDS-PAGE分析其純度及分子量，得知其分子量約19kDa，由12.3kDa及6.7kDa兩條多胜鏈以雙硫鍵連接所組成，屬於Kunitztype蛋白酶抑制劑。KFTI對胰蛋白酶抑制作用其莫爾數比為1:1，動力學的分析其抑制胰蛋白酶的活性作用是屬於競爭性的抑制作用，解離常數(dissociation constant, Ki)為1.78 ×10⁻⁹M。進一步對此蛋白的性質研究：以100℃高溫處理10分鐘，仍具有70%抑制胰蛋白酶的活性，可知KFTI對熱具有非常高的穩定性；在pH值3.0-10.0範圍內反應60分鐘，顯示KFTI抑制胰蛋白酶的活性在廣泛的的pH值環境下，仍保持其結構的穩定性，活性不受pH值的影響；但在0.2% SDS作用10分鐘，尚有不到10％的活性，可見其構造對SDS非常不穩定; 以5mM DTT處理10分鐘後，KFTI抑制胰蛋白酶的活性只剩下5%，可知雙硫鍵對其構形的穩定有絕對的重要性。

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