期刊刊名：健康管理學刊 　 卷期：14卷2期

篇名出版日期：2016年12月1日

作者：林旻慶,王海龍,洪志宏

語言：Chinese

關鍵字：鵲豆,胰蛋白酶抑制劑,Lablab purpureus, trypsin inhibitor, Bowman-Birk

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摘要：
本實驗以鵲豆（Lablab purpureus）種子為材料，利用硫酸銨分割、Sephadex G-50、DEAE-cellulose 52陰離子交換樹脂及trypsin-Sepharose 4B親和性管柱，可以從鵲豆種子中純化出一種胰蛋白酶抑制劑（Lablab purpureus trypsin inhibitor），簡稱LPTI。以MALDI-TOF質譜儀分析LPTI，得知其分子量為8.24 kDa，依其分子量大小是屬於Bowman-Birk type胰蛋白酶抑制劑。進一步對此蛋白的性質研究，發現LPTI在溫度到達90及100℃時，其抑制胰蛋白酶的殘留活性仍有90%左右，對溫度具有非常高的耐受性；LPTI在不同pH的緩衝溶液處理下，活性仍保有88%以上，可知其結構的穩定性不受pH值的影響而有所改變；在不同濃度的DTT處理下，抑制胰蛋白酶的活性隨著DTT濃度升高而下降，故維持LPTI活化位置(active site)的構形穩定與分子內雙硫鍵的存在有明顯的相關性。LPTI抑制胰蛋白酶作用其莫耳數比為1：1。利用Lineweaver-burk double reciprocal plot及Dixon plots分析顯示，LPTI對胰蛋白酶的抑制是屬於競爭性抑制作用，抑制常數（inhibition constant，Ki）為1.9×10⁻⁹ M。

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