期刊刊名：健康管理學刊 　 卷期：16卷2期

篇名出版日期：2018年12月1日

作者：廖美怡,王海龍,洪志宏

語言：Chinese

關鍵字：花豆,Bowman-Birk型蛋白酶抑制劑,動力學,Phaseolus coccineus, Bowman-Birk-type proteinase inhibitor, kinetics

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摘要：
以花豆（Phaseolus coccineus）種子為材料，利用硫酸銨分割、DEAE-cellulose 52陰離子交換樹脂及trypsin-Sepharose 4B親和性管柱等方法，純化出一種花豆胰蛋白酶抑制劑（Phaseolus coccineus trypsin inhibitor，PCTI）。以15% SDS-PAGE分析純度及利用MALDITOF質譜儀分析PCTI的分子量，得到其分子量為8.92 kDa，屬於Bowman-Birk型蛋白酶抑制劑。進一步研究PCTI的性質，PCTI在溫度到達 80℃及100℃時，其抑制胰蛋白酶的殘留活性仍保持在80％以上，顯示其對溫度具有高度的耐受性；PCTI在不同pH的緩衝溶液處理下，其抑制胰蛋白酶的殘留活性仍保持在80％以上，可知其結構的穩定性不受pH值的改變而有所影響；在不同濃度的DTT（還原劑）處理下，抑制胰蛋白酶的殘留活性隨著DTT濃度升高而下降，顯示維持PCTI活化位（active site）的構形穩定與其分子內雙硫鍵的存在有顯著的相關性。PCTI抑制胰蛋白酶作用其莫耳數比為1：1。以酵素動力學Lineweaver-Burk double reciprocal plot及Dixon plots分析，顯示PCTI對胰蛋白酶的抑制是屬於競爭性抑制作用，抑制常數（inhibition constant，ki）值為8.96 x 10¯⁹ M。

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